Πώς να καθαρίσει και να αναγεννούν ένα C8 στήλη HPLC

υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης ( HPLC) είναι μία κοινή μέθοδος ανάλυσης εργαστηρίου στην οποία ένα δείγμα διαχωρίζεται σε χημικά συστατικά της, όπως είναι διέρχεται μέσω μιας στήλης . Η στήλη γεμίζεται με ένα πορώδες συσκευασίας συνήθως βασίζονται σε αγωγή πυριτικής πηκτής . Μια τυπική στήλη ανάστροφης φάσης, όπως ένα C8 , μπορεί μερικές φορές να γίνει φραγμένη ή μολυνθεί . Τέτοιες στήλες μπορεί συχνά να αναγεννηθεί χρησιμοποιώντας μερικές απλές τεχνικές. Τα πράγματα που θα χρειαστείτε
όργανο HPLC
Νερό
μεθανόλη
ακετονιτρίλιο
Isopropanol
Μμεθυλενοχλωρίδιο
εξάνιο
Η Εμφάνιση Περισσότερες οδηγίες
Αναζωογόνηση μια στήλη
Η

1 Αφαιρέστε το λερωμένο στήλη και να αντιστρέψει τη θέση της , έτσι ώστε η κινητή φάση εισέρχεται τώρα σε ό, τι είναι συνήθως η έξοδος της στήλης . Συνδέστε μια γραμμή εξόδου στο άλλο άκρο της στήλης ( το άκρο που ήταν αρχικά η είσοδος ) , και να τρέξει αυτό σε ένα δοχείο απορριμμάτων . 2

αντλία μέσα από μια σειρά διαλυτών κατά φθίνουσα σειρά πολικότητας . Μια βασική συνιστώμενη σειρά είναι να ξεκινήσει με μεθανόλη , στη συνέχεια, την πρόοδο μέσα από ακετονιτρίλιο , ακετονιτρίλιο /ισοπροπανόλη ( 75:25) , ισοπροπανόλη , χλωριούχο μεθυλένιο και εξάνιο. Εάν η κινητή φάση αρχικώς κάθεται στη στήλη ήταν ένα ρυθμιστικό διάλυμα, μια πλύση με νερό πρέπει να προηγείται της μεθανόλης . Ένας ρυθμός ροής του 1 έως 2 ml ανά λεπτό είναι συνήθως κατάλληλη , και περίπου 10 όγκους στήλης κάθε διαλύτη θα πρέπει να αντλείται διαμέσου . Ο όγκος της στήλης είναι ο εσωτερικός χώρος που δεν καταλαμβάνεται από τη συσκευασία και υπολογίζεται ως ( 0,7 x π x ( ID /2 ) ^ 2 x L ) , όπου ID είναι η εσωτερική διάμετρος της στήλης και L είναι το μήκος του .


3

αντλία άλλο 10 όγκους στήλης ισοπροπανόλης διαμέσου της στήλης για να το προετοιμάσει για χρήση με την αρχική κινητή φάση. Αν ρυθμίστηκε η αρχική κινητή φάση , η αντλία και το νερό μέσω της στήλης μετά την ισοπροπανόλη , πριν την επιστροφή στο αρχικό ρυθμιστικό κινητής φάσης .
Η

4 Αποσυνδέστε τη στήλη και να αντιστραφεί και να επανασυνδεθεί , έτσι ώστε να βρίσκεται στη θέση κανονική διαμόρφωση (δηλαδή , με την κινητή φάση που αντλείται μέσα στην είσοδο της στήλης) . Επανασυνδέστε την έξοδο της στήλης προς τον ανιχνευτή .
Η
εικόνων