Υπάρχουν στην πραγματικότητα 25 ακίδες συνολικά σε μια σειριακή θύρα DB-25. Αυτό είναι ένα pinout DTE (Data Transmission Equipment) ή υπολογιστής, σε αντίθεση με το DCE (Data Communication Equipment), το οποίο είναι ένα μόντεμ ή μια συσκευή δικτύου. Τα δεδομένα συνήθως αποστέλλονται μέσω του ακροδέκτη 2 και λαμβάνονται στον ακροδέκτη 3, αλλά μπορούν να σταλούν και μέσω άλλων ακίδων, ανάλογα με το σχήμα καλωδίωσης του καλωδίου.