Ανακινήστε απαλά τα κύτταρα για να πάρει ένα ομοιόμορφο εναιώρημα . Αφαίρεση ενός όγκου των κυττάρων , όπως 1,0 χιλιοστόλιτρο (ml) , με πιπέτα και να μεταφέρει σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα. Αραιώστε τα κύτταρα για να δώσει 100.000 έως 500.000 κύτταρα ανά ml - αυτό πρέπει να παρέχει τα περίπου 100 κυττάρων που απαιτείται για τη στατιστική σημασία κατά την καταμέτρηση
Η 2
Αραιώστε τα κύτταρα , εάν είναι αναγκαίο , με την προσθήκη 9,0 ml του μέσου για την. 1.0 ml των κυττάρων. Ανακατέψτε και καταγράφει την αραίωση . Αν τα κύτταρα εξακολουθούν να υπάρχουν υπερβολικά συμπυκνώθηκε , αφαιρέστε 1,0 ml αραιωμένου κυττάρων σε ένα φρέσκο σωλήνα , προσθέστε 9,0 ml του μέσου , αναμειγνύεται και καταγράψτε την αραίωση. Τα κύτταρα των θηλαστικών αναπτύσσονται συνήθως στην περιοχή από 100.000 έως 5.000.000 ανά ml , έτσι 0 έως 2 αραιώσεις πρέπει να είναι επαρκής .
Εικόνων 3
Αναμίξτε τα κύτταρα από την τελική αραίωση . Αφαιρέσει ένα μικρό όγκο, όπως 0,1 ml, και τοποθετείται σε ένα νέο σωλήνα . Προσθέστε ένα ίσο όγκο κυανού τρυπανίου , αναμειγνύεται και καταγράφει την αραίωση. Τα νεκρά κύτταρα καταλαμβάνουν τρυπανικό μπλε και θα εμφανιστεί μπλε κάτω από το μικροσκόπιο .
Εικόνων Μετρώντας
Η 4
Πολωνική το αιματοκυτταρομέτρου και καλυπτρίδα με χαρτί φακό , και τον τόπο καλυπτρίδα στο πλέγμα hemocytameter . Προσθέστε μια σταγόνα αραιωμένα κύτταρα στο σχήμα V δίπλα στο πλέγμα . Κύτταρα κινούνται κάτω από την καλυπτρίδα με τριχοειδή δράση .
5
Τοποθετήστε τη διαφάνεια στο μικροσκόπιο, εστιάζονται στο δίκτυο και τη χρήση μετρητή χέρι ψηλά για να μετρήσετε τις βιώσιμες , όχι μπλε , τα κύτταρα . Τα κύτταρα δεν πρέπει να αλληλεπικαλύπτονται ? Εάν πάρα πολύ πυκνά , εκτελέστε άλλη αραίωση . Εάν τα κύτταρα είναι πάρα πολύ αραιά , να προετοιμάσει ένα πιο συμπυκνωμένο δείγμα .
Η
6 Αφαιρέστε το αιματοκυτταρομέτρου , καθαρό , reload , και μετράνε πάλι . Μετρήστε κάθε δείγμα των κυττάρων τρεις φορές .
Εικόνων Υπολογισμός
Η 7
Υπολογίζεται ο αριθμός των κυττάρων ανά ml . Το πλέγμα αιματοκυτταρομέτρου χωρίζεται σε 9 μεγάλες πλατείες , το καθένα με όγκο 0,1 ml .
8
Διαιρέστε τον αριθμό των κυττάρων που μετρήθηκαν με τον αριθμό των μεγάλων τετραγώνων χρησιμοποιούνται ( εννέα , αν χρησιμοποιείτε το σύνολο του δικτύου ) , και πολλαπλασιάστε με 10.000 για να πάρει κύτταρα ανά ml . Πολλαπλασιάστε με το συντελεστή αραίωσης ( ες ) για την τελική συγκέντρωση .
Η 9
καταγράφει την ημερομηνία, το δείγμα , ο αριθμός των κυττάρων , οι συντελεστές αραίωσης και τελικό αριθμό κυττάρων ανά ml . Ετοιμάστε ένα γράφημα του αριθμού των κυττάρων συναρτήσει του χρόνου για να δείξει την ανάπτυξη των κυττάρων .
Η
εικόνων
Πνευματικά δικαιώματα © Γνώση Υπολογιστών Όλα τα δικαιώματα κατοχυρωμένα